葉酸是一種重要的B族維生素,若人體內葉酸不足會引起巨紅細胞貧血、精神科疾病、心臟病、癌癥、胃腸功能異常和中風。由于葉酸是細胞繁殖中生成必要的DNA所不可少的物質,孕婦缺乏葉酸會造成胎兒神經管畸形、孕婦先兆子癇、胎盤早剝發生率增高。
葉酸廣泛存在于各種動植物食品中,但天然食品所含葉酸大部分含量不高,以多谷氨酸葉酸形式存在,吸收率不高,且葉酸在人體內停留時間不長,人們通常在食品中強化吸收率高的單谷氨酸鹽形式葉酸。美國1998年1月1日起已強制在某些谷物食品中強化葉酸,FDA規定每1千克谷物食品強化1.4mg葉酸。我國已在嬰幼兒、孕婦、老年食品中強化葉酸。目前葉酸含量測定方法有:微生物法、放射免疫法、氣質聯用法等，經典的微生物法操作繁瑣，易受廣譜抗生素的影響，屬半定量法，放射免疫法測定值易偏高，且操作質控要求較嚴，不能有效區分同效維生素。本法利用葉酸經氧化劑氧化后具有熒光特性，采用柱后衍生熒光檢測器測定，大大提高了檢測葉酸的靈敏度(較紫外檢測提高了2個數量級),避免了使用離子對試劑傷害柱子且能夠準確定量。
液相柱后衍生法在嬰幼兒食品葉酸測定中的應用：
采用反相高效液相法,選用含12乙腈+880.05mmol/L磷酸二氫鉀溶液(pH=3.5)作為流動相,流速1ml/min,經ODSC-18反相色譜柱分離,柱溫設為40℃,以0.5過二硫酸鉀溶液為衍生劑,流速為0.3ml/min,反應溫度為60℃,使用熒光檢測器檢測定量,激發波長為365nm,發射波長為450nm,外標法測定葉酸含量。結果:本法測定線性范圍能達到40～500μg/L,相關系數為0.9992,低定量檢測限為28.72μg/L,平均回收率能達到86.6～96.0,相對標準偏差為1.5。結論:本方法簡單、快捷、靈敏,滿足日常分析要求。
